期刊简介
《华南国防医学杂志》由中国人民解放军广州军区联勤部卫生部主管，广州军区医学科学技术委员会主办，广州军区武汉总医院承办。创刊于1986年，现为双月刊，国内外公开发行。本刊主要是以军内外广大医学临床与医学科研工作者为面向，以刊载基础医学、临床医学、军事医学及其相关学科的科研论文为主体的综合性医学学术性期刊。目前本刊是中国科技论文统计源（核心）期刊，是美国《化学文摘》（CA）、《中国核心期刊（遴选）数据库》、《中国期刊全文数据库》、《中国学术期刊综合评价数据库》、《中文科技期刊数据库》、《中国生物学文献数据库》、《解放军医学图书馆数据库》、《中国学术期刊（光盘版）》、《中国期刊网》的收录期刊。
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- 杂志名称：华南国防医学杂志
- 主管单位：广州军区联勤部卫生部
- 主办单位：广州军区医学科学技术委员会
- 国际刊号：1009-2595
- 国内刊号：42-1602/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 剑桥科学文摘, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中)
簇分化抗原74基因转染对人脐静脉内皮细胞ECV304特性的影响
姜艳红
关键词：簇分化抗原74, 人脐静脉内皮细胞, 基因转染, 人类白细胞抗原
摘要：目的 探讨簇分化抗原74(cluster of differentiation 74,CD74)基因在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)的转染条件和CD74基因转染对细胞特性及功能的影响,为深入研究基于调节CD74表达的生物治疗打下基础.方法 ①将含有CD74 cDNA的pCMV-CD74增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)质粒通过转化大肠杆菌进行扩增、质粒提取、并经酶切和测序进行鉴定；②将pCMV-CD74质粒转染脐静脉内皮细胞ECV304,通过EGFP荧光质粒对ECV304细胞进行转染率的检测；③采用免疫组化法和Western blot,检测转染前后ECV304细胞CD74分子的表达；采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测转染后CD74 mRNA水平的表达；④pCMV-CD74质粒转染前后ECV304细胞功能相关基因人类白细胞抗原-A(human leukocyte antigens A,HLA-A)、人类白细胞抗原-DR (human leukocyte antigens DR,HLA-DR)、γ-干扰素受体(interferon-γ receptor,IFNGR)表达的检测:采用RT-PCR比较转染前后脐静脉内皮细胞各功能相关基因的表达；⑤应用RT-PCR分析软件分析实验数据.结果 转染前后ECV304细胞HLA-A△Ct值分别为9.4881和12.1097,2 -△△Ct为6.1543大于2,说明转染前后HLA-A表达有统计学差异；IFNGR △Ct值分别为4.9828和5.5228,2-ΔΔCt为1.4539小于2,转染前后无统计学差异；HLA-DR△Ct值分别为14.1098和14.7924,2 - ΔΔCt为1.3036小于2,转染前后无统计学差异.结论 人脐静脉内皮细胞ECV304表达HLA-A、HLA-DR、IFNGR和CD74mRNA; pCMV-CD74转染可增加ECV304细胞CD74基因和膜分子的表达,增加HLA-A基因的表达,但不增加HLADR和IFNGR的表达.
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