姜黄素对慢性坐骨神经结扎损伤大鼠脊髓背角神经元中PDCD5表达的影响

摘要：目的 观察姜黄素(curcumin,Cur)对慢性坐骨神经结扎损伤大鼠脊髓背角神经元中程序细胞死亡因子5(programmed cell death 5,PDCD5)表达的影响.方法 建立慢性坐骨神经结扎损伤(chronic construction injury,CCI)模型;健康雄性SD大鼠84只,随机分为6组:空白对照组(n=4)、假手术组(Sham组)(n=16)、神经结扎组(CCI组)(n=16)和不同浓度姜黄素组[Cur 50 mg/kg组(n=16)、Cur 100 mg/kg组(n=16)及Cur 200 mg/kg组(n=16)].Cur组行坐骨神经结扎,并腹腔注射姜黄素50、100、200mg/(kg·d),持续至术后21 d.Sham组,CCI组和Cur组按取材时间不同分为4个亚组(n=4),即术后3d亚组、术后7d亚组、术后14d亚组和术后21 d亚组.分别于术前2d及3d、7d、14d和21 d测定行为学;采用末端生脱氧核糖核苷酸转移酶介导生物素标记(terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)标记法标记脊髓背角浅层凋亡细胞;免疫印迹法(Western blot,WB)法检测PDCD5蛋白的表达.结果 空白组与Sham组相比,MTW和TWL差异无统计学意义(P＞0.05).CCI组术后MTW和TWL逐渐降低,在第14d时降至低值.给予Cur 100 mg/(kg·d)处理后,MTW和TWL逐渐增加,与CCI组在3d、7d、14d及21d比较,差异有统计学意义(P＜0.05).空白组与Sham组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).CCI组在术后3d即出现凋亡细胞增多,细胞凋亡高峰期出现在术后7～14d,与Sham组相比,差异有统计学意义(P＜0.05);给予不同浓度Cur处理后,凋亡细胞在术后3d开始减少,Cur 100 mg/(kg·d)组与其他Cur组相比,差异有统计学意义(P＜0.05);另可见Cur 100 mg/(kg·d)组在术后7d、14d及21 d,与其他Cur组、CCI组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).空白对照组与Sham组在3d、7d、14d及21 d时的PDCD5蛋白均为低水平表达,差异无统计学意义(P＞0.05).而CCI组PDCD5蛋白的表达水平,在3d时已开始增高,在7d及14d时,PDCD5蛋白表达水平明显增高,14d为PDCD5蛋白表达的高峰期,与Sham组比较,二者差异有统计学意义(P＜0.05);在21d时,PDCD5蛋白表达较7d及14d时降低,但仍高于3d时的表达水平.给予低浓度Cur处理后,PDCD5蛋白表达水平较CCI组开始降低,在Cur 100 mg/(kg·d)组,PDCD5蛋白表达明显减低,与CCI组比较,二者差异有统计学意义(P＜0.05).在Cur200 mg/(kg·d)组,PDCD5蛋白表达较Curl00 mg/(kg·d)组升高,二者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 姜黄素可以减轻CCI诱发的神经病理性痛行为,减少脊髓背角神经元细胞的凋亡,其机制可能与抑制PDCD5蛋白的表达有关.